Grupo: Leitora de microplacas Categoria: Leitoras de microplacas
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Os sais de tetrazólio, são utilizados em ensaios colorimétricos como o MTT para avaliar a atividade metabólica celular. Células viáveis produzem enzimas que convertem o MTT (brometo de 3-[4,5-dimetil-tiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazólio) de coloração amarela, para cristais de formazan de coloração roxa. Quanto mais células viáveis presentes em uma amostra, maior a intensidade da coloração. O formazan insolúvel é solubilizado através da adição de um segundo reagente e em seguida, a absorbância das amostras é medida a 590 nm em uma leitora de microplacas para análise da viabilidade ou proliferação celular. Embora fácil de executar, o ensaio de MTT requer a adição de dois reagentes e etapas de incubação, o que pode ser um problema, quando o tempo é limitado ou quando se tem numerosas amostras. Aqui trazemos a comparação entre um ensaio de MTT e um ensaio de citotoxicidade de células colorimétrico (Ambos da ABCAM). Neste último ensaio citado, um único reagente é adicionado às células e depois da incubação, a absorbância é medida em 570 e 675 nm. Ambos os ensaios mencionados podem ser utilizados para medir a proliferação celular (células viáveis) e citotoxicidade. A escolha será baseada principalmente no fluxo de trabalho desejado e tempo necessários.
O sensor PathCheck, é uma nova e revolucionária tecnologia presente nas leitoras de microplacas SpectraMax da Molecular Devices. É utilizado para medir o nível de líquido em cada poço de uma microplaca. O Pathcheck permite a obtenção de valores de absorbância como se estivesse utilizando uma cubeta (com caminho óptico de 1 cm). Desta maneira, detecta erros de pipetagem e faz a correção das diferenças de volume nos poços. O Sensor PathCheck mede o comprimento do caminho óptico utilizando o pico de absorção da água na região espectral do infravermelho próximo (NIR). A altura do pico de absorbância da água é proporcional ao comprimento do caminho óptico através da amostra (que, em um poço da microplaca, é proporcional ao volume da solução). O sensor PathCheck faz medições de absorbância NIR independentes da temperatura e o Software SoftMax Pro realiza os cálculos de correção automaticamente.