A coluna para hplc utiliza a sílica ou material polimérico como fase estacionária, ou seja, base estrutural para aplicação da fase ligada, que dependerá do mecanismo de separação a ser utilizado. A coluna para hplc é fabricada em aço inoxidável de alta qualidade, garantindo a resistência necessária para suportar pressões de até 6000 psi. A dimensão da coluna para hplc determina qual o volume máximo de amostra que poderá ser injetada durante a análise. As colunas para hplc de fase reversa são as colunas mais comuns e tilizam sílica ou polímeros como fase estacionária. Sua superfície é quimicamente modificada por compostos apolares (hidrofóbicos), que irão interagir com uma fase móvel mais polar. A vida útil de uma coluna para hplc depende muito da pressão de trabalho, dos solventes utilizados, entre outros cuidados que o usuário precisa se preocupar, como filtração de fase móvel e amostra, qualidade do solvente, entre outros.